单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于表面抗原外来物种特情人、寡核苷酸呈现制造费偏贵或实际操作操作步骤复杂的。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯教学销售团队在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低代价、跨动物群、全电商平台兼容的全新解决方案。

刊物简单

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由华人物理学校隔代基因性基因与大怪物学探讨方案所和华人隔代基因性基因学好主办方的时代国际学术性交流杂志期刊杂志杂志论文，秉承于曝光生态学物理学和医药学隔代基因性基因学邻域的创作性探讨方案优秀成果。JGG 202多年度影向细胞因子7.1，Scopus学术性交流杂志期刊杂志杂志论文评分指标体系CiteScore 9.9，位居JCR 202多年度GENETICS & HEREDITY邻域Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY邻域Q1区，位居华人物理学校杂志期刊杂志杂志论文系统盘怪物学类项1区(Top杂志期刊杂志杂志论文)，隔代基因性基因学和血生化与原子怪物学小类双1区。

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甚么是HEATag

婉转的“二一体化”设计的概念

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组成部分的融成核蛋白

「定位功能器」控制模块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化表达（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「链接器」模组 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索长条码来进行共价链接。

“1+1>2”的使用效果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行范例标上与追溯。

Fig1: HEATag各种方面标出工作原理展示图

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入门测试

HEATag究竟 有点能打？

能够在各种不同水平下，改变喂乳甲壳动物血上皮细胞系单血上皮细胞混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。学习团队图片为 HEATag 软件设置了多轮 “负荷测试英文”，从受损細胞系到受损細胞核，从干燥到温度过低，从新鲜模本到调整模本，全周边所有地方证实它的固确定和正规性。

一是轮测式对应蒲乳期节肢动物癌受损肿瘤细胞系：研究深入分析的人员进行了产于人、鼠、仓鼠两个鱼类的七种癌受损肿瘤细胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在室内温度下要 HEATag 标志后混合法测序。终结收回的 11447 个癌受损肿瘤细胞中，85.66% 都能采用 HEATag 条状码确切一直到原鱼类，样版间交叠空气污染较少，UMAP 聚类算法深入分析更多的是之间证明文件，HEATag 条状码与鱼类特异形染色体组显著特点层面一直。 然后接着，测试测试前提前提标准进一大步发展：探析者常试在 4℃下箭头新鮮生殖血组织体生殖细胞、在制冷下箭头甲醇加固生殖血组织体生殖细胞，虽然就直接箭头生殖血组织体生殖细胞。最终我始终亮眼睛：那些前提前提标准下，样板元素与种群新信息均含有非常不错的相应的性，分割准确的率超 95%。纵使甲醇加固会造成的重度的转录本交错式生态破坏，生殖血组织体生殖细胞配制就有大量 RNA 掉失，生殖血组织体生殖细胞类别的注脚最终我始终与新鮮样板要保持共同，单位证明 HEATag 可不可以箭头区别治理前提前提标准下的实验室样板。

Fig2: HEATag 可在有所差异前提条件下到位单细胞系转录组混样研究

并能标记图片辅乳期植物和浅海无脊柱植物的原代体细胞

如何说癌血细胞系软件测试是 “条件题”，那企业范例量即是 “扩展题”， 此类范例量必然因癌血细胞方式繁杂、学习环境不适应力异常，变为标识技木的 “突破点”，而 HEATag 正好在此类 “突破点” 上创造了优点。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸集体，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不仅仅能被更准确区别，因此主要是細胞的类型的聚类分析最终都明显可辨。

更令人惊喜的是HEATag对深海生物制品的兼容性测试性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长形码与植物物种转录组有较高不一样性，不现身因高盐大环境导致的 “箭头发挥不了作用”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可实行母乳喂奶甲壳动物团队模板众多 scRNA-seq 数据分析

Fig4: HEATag可确保清爽浮游生物无脊椎骨绿色几斤 scRNA-seq 浅析

HEATag与内部的综合不可能出现转录组的正相关变

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在来完成标签日常任务的并且，没有对之后的转录多组分析出现干挠，衡量了研究分析数据资料的真正性。

Fig5: HEATag不想引响样品的 RNA 体现的模式

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在前程无限

HEATag 能为单癌细胞研究探讨引来什么东西？

HEATag 的市场价值，远不停于 “应对符号故障 ”，它的利索性和普遍意义，就在为单细胞膜科研开很多几率性

从软件拜谱生物看到

HEATag 能履盖从 “容易比分析一下”（如癌策划 开展业务开展业务与正确策划 开展业务开展业务、中药正确处理与差表）到 “大占比分析方案”（如策划 开展业务开展业务神经细胞系图谱设计、mtk量筛分）的全範圍所需。发生变化 PIP-seq、Stereo-cell 等创新型可初始化新技术的的发展，HEATag 还能进第一步的提升单神经细胞系分析方案的通量，帮助科研开发微商团队开展业务较大占比的工程项目。

从跨业务领域潜力股你看

HEATag 不仅能不适使用于转录组学，还能与表观dna组学、核蛋白组学、个人空间组学等能力紧密结合，进行定制网站引索和寡核苷酸回文序列，HEATag 也能够方便渗透差异的组学标准流程，不决定走势获取深入。并且，依托于HEATag还也能够趋势单細胞糖组学探讨能力。

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战略合作动态展示

拜谱生物体与陈凯专家教授形成最初始合作方式有意向

值不值得私信的是，在 HEATag 技巧展露出巨型用途竞争力的的背景下，拜谱微生物技术制品已与我国南部海上资源科学性与建筑项目福建实践室（北京）陈凯讲解确定进行联合有意愿。双方彼此岗位计划需紧紧围绕 HEATag 技巧的房产化落地页、科学导出等方向上开展角度区域合作，促进这一个低代价、跨植物物种的单上皮体肿瘤细胞标签技巧速度快用途于合理科学游戏场景，为其他的实践室打造高效、性价比最高、国家经济的单上皮体肿瘤细胞研发软件，四轮驱动科学岗位者在上皮体肿瘤细胞微生物技术制品学、海上资源微生物技术制品学、的疾病管理机制等领域作为其他的突破自我