肉的宰后嫩化最主要归因于肌原弹性食物纤维棉架构的损坏，肌原弹性食物纤维棉架构是由内源性核淀粉酶质溶解酶挥发肌原弹性食物纤维棉和細胞骨架核淀粉酶质带来的。与一百多年来始终是注重焦聚的钙核淀粉酶质酶不一，胱天核淀粉酶质酶（caspases）最进已成为感吸引说说题。胱天核淀粉酶质酶在細胞凋亡的完成分阶段起着至关更重要的效应，在其中caspase-3在去逝核淀粉酶质溶解中的效应是多多面和繁杂的，所以非常值得进这一步科学探析。S-亚硝基化按照调整钙增加、电量代谢转化、核淀粉酶质质挥发和細胞凋亡来调整肉肥，收录嫩度和持水能力素质。之前科学探析发现了S-亚硝基化能否降低依靠线粒体的caspase-3级联现象，这也许是力量細胞凋亡和羊肉品味发生改变的其原因。caspase-3的科学探析重心是其与細胞凋亡的关系的，那么，不大有科学探析浅议S-亚硝基化调整caspase-3的逻辑。

2024年9月由深圳现代农业师范大学张万刚教学团体在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物技术为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名宝贝标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202几年直接影响要素：5.7

提出时候：2024年9月

加盟商的单位：南京农业大学

研究分析的原材料：蛋白

拜谱作为技术应用：亚硝基化修饰组学

的技术路经：

一、研究方案数据

01.Caspase-3灵活性

当今尚不清晰NO对caspase-3的阻止功能能不能归因于NO介导的S-亚硝基化，区别氧浓度系数的GSNO作外源性NO现货供应，以介导caspase-3的身体外S-亚硝基化。报告单系统阐述，与不GSNO的组相对，100、200和400μM GSNO组的caspase-3特异性酶类显著性减轻（图1），与前者媒体报道不对。GSNO加工减轻caspase-3特异性酶类的潜在性情况仍仍待系统阐述。

图1 有差异 溶度的GSNO补救对caspase-3亲水性的应响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化程度上

学习探讨Caspase-3的亚硝基化状态，以阐释GSNO对Caspase-3的反馈性。经GSNO整理后，判断到caspase-3蛋白质S-亚硝基化抗压强度增多（图2）。以下最后表达，外源性GSNO养成可顺利引导caspase-3的休外S-亚硝基化。更让人特别的是，在不能GSNO会存在的对应组中判断到一家变弱的S-亚硝基化带，这表达caspase-3可以发现内源性的S-亚硝基化。不仅如此，本学习探讨中caspase-3的S-亚硝基化状态较高，而caspase-3的可溶性降底，这与前面的学习探讨相一致。可是，caspase-3的特情人S-亚硝基化表达位点尚不清除，还必须要进一歩的打磨。

图2 GSNO补救对caspase-3S-亚硝基化含量的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化突显组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码队列。颜色箭头的编码队列说明S-亚硝基化肽，黄色箭头的C说明S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3溶解结淀粉酶

结淀粉酶当作一个决定性性的肿瘤细胞系骨架淀粉酶，在保证肌肿瘤细胞系框架的框架可用性性和做收缩性方便起侧重于要性角色，分析S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶挥发的辨别力和理性性更具决定性性有何意义。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的起始肌植物弹性纤维淀粉酶）组相较于，0 μM GSNO组（肌原植物弹性纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的可用性结淀粉酶成分有效降低，提醒caspase-3对结淀粉酶更具潜在性的的淀粉酶溶解效果。在GSNO孵育后，可用性结淀粉酶的成分强烈加大（P < 0.05）。还有，当GSNO溶液浓度提升时，可用性结淀粉酶的成分定期上浮（P < 0.05）（图5）。相应发现了得出结论，SNO表达的caspase-3以能力依耐的策略减弱结淀粉酶的挥发。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙淀粉酶-T

肌钙血清-T (TnT)是原肌球血清上下调整否则全身肌肉缩紧的丝条的必备肌原化学钎维血清。TnT的分解塑料塑料特证是检则到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化条件下，caspase-3对TnT的分解塑料塑料情況如图一样6一样，与Std组（不含有caspase-3和GSNO的肌原化学钎维）比起，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写有很大增多，意味着caspase-3组织了TnT的分解塑料塑料，显然，caspase-3与GSNO的孵育诱发30 kDa TnT急剧下降。在100和200 μM GSNO组之前是没有检则到很大的不同之处(P > 0.05)，而当GSNO的盐浓度符合400 μM 时，该细节描写有很大变少(P < 0.05)。这会发现意味着了SNO呈现的caspase-3对TnT分解塑料塑料的促使反应。结血清和TnT是caspase-3的强烈底物，而GSNO净化处理减少caspase-3的渗透性有机会诱发肌原化学钎维血清分解塑料塑料因素减少。与此同时所诉，NO介导的S-亚硝基化行凭借呈现半胱氨酸残基来上下调整caspase-3的渗透性，转而进1步导致其对结血清和TnT的血清水解反应作用，导致导致鸡肉茶叶品质。

图6. S-亚硝基化caspase- 3溶解肌钙蛋白酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本浅析为了浅析S-亚硝基化对caspase-3淡化的印象基本自后对牛羊肉肌原玻璃玻璃纤维体内生物降解的印象。蛋清酶质S-亚硝基化也可以淡化caspase-3的半胱氨酸残基，为了从而导致caspase-3活力性大大减少，进步仰制了其对牛羊肉肌原玻璃玻璃纤维蛋清酶质的蛋清酶质电离效率。

三、拜谱个人总结

探索采取了酶活核查，亚硝基化呈现组学介绍，WB等检查科技手段，发觉蛋清S-亚硝基化也可以呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这引致了caspase-3渗透性的较低，相结一部促使了其对羊肉肌原氯纶蛋清的蛋清溶解专业能力。本探索为释意蛋清质亚硝基化对色泽的自我调节制度化具备了一大个新的视野。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球球蛋白组学、淡化球球蛋白组学、代谢率组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系统产品设备，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total氧化反应恢复、悬浮巯基，欢迎大家咨询！

学习资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663